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桑椹胚
morula

胚胎發育初期、一團實心細胞球包覆在透明帶(zona pellucida)中的階段,。

科學人2010年7月號2050年大預言:複製人

 

 

 

 

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轉殖麻煩
動物複製的成功並沒有擴展到人類
撰文╱狄路德(Cathryn M. Delude)
翻譯/彭仁隆
 

抗培養皿:跟其他物種比起來,靈長類的複製一直以來都很困難。圖片為牛胚胎的複製過程。
小鼠跟豬很容易;大鼠比較困難;人類仍然很難,但沒有猴子那麼難!沒有人知道為什麼有些物種的複製比其他的困難,但是利用小鼠的研究可以幫助我們鑑別造成差異的原因,並最終讓研究人員成功取得人類胚胎幹細胞,以治療疾病及替換器官。

以醫療性複製而言(或稱為細胞核轉殖),最著名的成就是來自於韓國國立漢城大學(Seoul National University)的黃武樹(Woo Suk Hwang)。今年2月,他所領導的實驗室發表了他們將數位捐贈者的細胞核植入242個去核的卵中,一共取得了30個囊胚(胚胎發育的初期階段),從其中只得到一個能自我複製分化的幹細胞株。

黃武樹的成就明顯指出,技術上運用人類細胞比老鼠細胞更困難。人類的卵子是很麻煩的:它比老鼠的卵子更大、更黏,也更脆弱。黃武樹說:「就像一個氣球去取代一個網球。」他捨棄原來將卵中細胞核抽取出來的標準方式,轉而小心地將核自細微的裂縫中擠壓出來。黃武樹發現比起小鼠的情形,人類的DNA在卵內重新運作要花上兩倍的時間,但胚胎幹細胞的分裂的速度卻只有一半。哈佛大學的生物學家艾甘(Kevin Eggan)解釋這與老鼠的情形不同,研究人員必須將胚胎幹細胞的內細胞團,從胚囊外細胞層(前胎盤細胞)移出,否則細胞會停止分裂。

其他的障礙則源自於缺乏經驗,黃武樹回憶說:「我們必須從最基本開始,並且嘗試每一個方法。」為了要有更好的選擇,他曾使用培養基的衍生物以培育牛的胚胎幹細胞。哈佛醫學院的梅爾頓(Douglas Melton)曾經自捐贈的胚胎中成功培育出17個新的胚幹細胞株。他解釋說,取得人類胚胎幹細胞的限制,以及法律上與道德上的爭議,也使得進展緩慢。梅爾頓同時指出開始的材料也會導致不同的結果。他以美國研究者的身分說:「在人類的研究,我們只有使用冷凍胚胎;但在老鼠身上,我們用的是新鮮的胚胎。」

其它的困境包括尋找適合細胞核轉殖的理想捐贈細胞,這個細胞必須容易取得且有效率。黃武樹用的是卵巢中的卵丘細胞,並不十分容易取得,在雄性上也不可行。

在效率方面,研究人員建議,捐贈細胞的成熟度及差異越低越好。麻州劍橋懷海德生物醫學研究所(Whitehead Institute for Biomedical Research in Cambridge)的複製鼠領導專家強尼許(Rudolf Jaenish)解釋說,最有效能、也最難取得的就是胚胎幹細胞。接下來的是成熟度稍高,但稀少且不易取得的成體幹細胞;然後是更容易取得,但已經分化成熟、形成組織的細胞。操作最困難且效率最低的是捐贈細胞,存在極度特化的免疫B細胞及T細胞中;然後是不分裂且高度特化的嗅覺神經元,這在不久前還被認為是無法複製的。然而在今年2月,強尼許、艾甘及哥倫比亞大學的阿克斯(Richard Axel)已經成功地利用嗅覺神經元細胞複製了老鼠,被譽為這是技術上的重大突破。

現在研究人員需要找到比神經元更有效能,比胚胎幹細胞更實用的捐贈細胞。艾甘說明在老鼠身上的實驗顯示,當卵已經成熟到可以準備授精及分裂時,最適合進行細胞核轉殖;如果轉殖的細胞核來自分裂快速的細胞(例如免疫細胞),那麼分裂的速率也會更快;如果捐贈的細胞核來自在非活動狀態的細胞,例如神經元或成體幹細胞,則胚胎幹細胞會更容易發育成為自我複製分化的細胞株。其實訣竅就是找到已經開始卵裂,且不斷產生幹細胞的捐贈細胞。

梅爾頓相信這種難題,只是細胞核轉殖在早期發展技術時的現象,他預測說:「再過幾年,這一切都會變得容易了吧!」。

【本文出自Scientific American 2004年10月號】

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